师弟
我做胞内蛋白纯化,过完镍柱跑了个 SDS-PAGE,这个 杂蛋白条带比目的蛋白条带还多是合理的吗?
很多胞内蛋白都会带有组氨酸,有时候目的蛋白只用 HIS 亲和标签,跑胶就会找不到目的条带。试试在另一端 再加一个亲和标签,Strep(II)和 Twin-Strep 都可以,二次亲和纯化后,目的蛋白会纯很多。
师姐
师弟
这就去改构建!
蛋白纯化中被低估的王者纯化方法亲和层析,虽然好用,但用错标签也竹篮打水一场空!标签种类繁多,零基础小白怎样才能 根据不同的蛋白性质和实验目的来选择合适的标签来进行纯化呢?
丁香实验联合 IBA Lifesciences 共同创建 蛋白质纯化宝典 2.0,在原版 1.0 的基础上更新了视频、图文及 protocol,包括 Strep 标签蛋白纯化流程、蛋白纯化步骤样本及缓冲液体积参考等,除了手把手教你 亲和层析以外,更有 提高蛋白的纯度和产量的技巧以及 日常纯化难题解答,统统都在专题内容里!
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那么常见的几种标签该如何选择呢?我们为大家整理了表格,可以根据目的蛋白性质和实验目的来进行选择~
以上内容来自丁香实验小程序 蛋白纯化实验宝典 2.0 专题。
《蛋白纯化实验宝典 2.0》
「视频、protocol、经验」
内容策划:王丹琦
内容审核:朱超敏
题图来源:图虫创意返回搜狐,查看更多
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