中国首次克隆出哥廷根小型猪 用于器官移植(图)

　　在研究中，作为核受体的卵母细胞来自屠宰场，因为成本低廉、采集方便。

科研人员从性成熟前的年轻母猪体内采集尚未成熟的卵母细胞，经过体外成熟培养后，把它的遗传物质去掉，然后把供体细胞注射进卵母细胞的卵周隙中。然后，通过一个融合仪，让供体细胞和卵母细胞融合为一体。再经过激活处理，它就开始像正常受精卵一样，发生卵裂等一系列胚胎发育过程。如果在囊胚期前把它移植到代孕母猪体内，就会复制、着床。

　　目前科学研究比较成熟的是克隆牛和克隆羊。克隆猪的难度较高，因为猪的卵子对低温特别敏感，体外操作时，室内温度一般不低于26℃，不能偏差太大，否则容易造成卵母细胞的损伤甚至死亡。不仅如此，卵子在体外成熟需要的时间也比较长，因此更不容易存活。现在只有英、日、美、澳、韩、丹麦和中国等少数几个国家获得过核移植猪。

　　实验进程在去年一度停滞了近3个月。实验人员回忆，那时，炎热的夏季刚刚过去，气候开始变得凉爽。工作人员立即开始恢复和检验核移植实验的卵母细胞成熟、胚胎构建以及培养等体系。卵母细胞经过成熟培养后，研究人员发现有时部分卵母细胞的质膜溶解、正常的卵周隙消失，进而死亡；即使使用形态正常的卵母细胞构建的胚胎也发育不到囊胚期，以为是培养液出了问题，把其中的几十种成分依此进行分析，还是找不到原因。科研人员无奈之中换了一家屠宰场取卵母细胞，问题一下子就解决了。原来是卵巢质量差，可能是牲猪在运输过程中的应激反应对卵母细胞造成了损害，从而影响卵母细胞的寿命以及重构胚的发育潜力。

　　“现在回过头去看觉得都不是什么大问题，可当时就是找不到原因。”李秋艳笑着感慨，“做科研往往就是这样，有时被一个意想不到的小问题卡住，一旦解决就会豁然开朗。”

　　今年1月29日，研究人员将400枚胚胎移植入两头母猪体内，其中1头怀孕，经过115天的孕育产下6头小猪。

　　记者在猪场看到，虽然两只小猪血统来自国外，但它们的“代孕母亲”却是一只肥硕的长白母猪。猪妈妈一点也不排斥这两个跟自己并不相像的孩子，两个小猪在它身上蹿上蹿下。

　　尽管是同一母亲所生，一窝小猪的血统却大不相同。除存活下来的两头哥廷根小公猪外，还有1头哥廷根小型猪出生存活12小时后死亡，1头哥廷根小型猪出生死亡，两头转有绿色荧光蛋白基因的克隆长白猪出生死亡。

　　有专家评价，这是在国际上首次实现了同一移植受体内进行不同品种和不同类型克隆胚胎的混合移植。

　　可惜的是，两头转基因小猪，其中一头生下来就有缺陷，不仅没有吞咽功能，而且前肢往内勾，站立不起来；另一头虽然发育正常，但生下来就没有呼吸和心跳。李秋艳解释说：“这有可能跟克隆有关，也可能跟转基因有关，因为转基因猪的发育异常率比较高，比如瞎眼、瘸腿。如果转入的外源基因插入位点不合适的话，就会影响某些基因的正常表达。”

　　科学家们很早就开始尝试进行动物克隆的研究。早期的动物克隆研究均是用两栖类和鱼类作材料。1962年，英国剑桥大学的研究人员进行了蛙胚胎核移植，获得成年蛙。我国已故科学家童第周教授曾于上个世纪60~70年代进行鱼类细胞核移植工作，获得属间和种间移核鱼，使我国鱼类核移植研究居世界领先水平。

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